ข้อดีพิเศษของ ELISA ที่ไวต่อการปั่นจักรยาน Thio-NAD ในการกําหนดโปรตีนไข้เลือดออก NS1

1. บทนํา

ไข้เลือดออกเป็นโรคติดเชื้อเฉียบพลันที่เกิดจากไวรัสไข้เลือดออกผ่านการกัดของยุงสายพันธุ์ Aedes (Ae. aegypti หรือ Ae. albopictus) ที่ติดเชื้อมีอาการหลัก เช่น ไข้สูง เวียนศีรษะ ปวดศีรษะ ผื่น และรุนแรงปวด (ปวดตา กล้ามเนื้อ ข้อต่อ หรือกระดูก) เป็นต้น โรคนี้แพร่หลายอย่างแพร่หลายในสภาพอากาศเขตร้อนและกึ่งเขตร้อน มีผู้ติดเชื้อประมาณ 100 ถึง 400 ล้านคนในแต่ละปี ซึ่งมากกว่า 80% มักจะไม่รุนแรงและไม่มีอาการ อย่างไรก็ตาม ไข้เลือดออกที่รุนแรงสามารถเพิ่มความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตได้หากไม่ได้รับการรักษาอย่างเหมาะสม ดังนั้นการวินิจฉัยโรคนี้ตั้งแต่เนิ่นๆ จึงมีความสําคัญต่อการรักษาอย่างทันท่วงที

เป็นที่น่าสังเกตว่าโปรตีนที่ไม่ใช่โครงสร้าง 1 (NS1) ซึ่งเป็นไกลโคโปรตีนที่อนุรักษ์ไว้สูงส่วนใหญ่จะถูกหลั่งออกมาในระหว่างการติดเชื้อของไข้เลือดออกไวรัสซึ่งถือเป็นปัจจัยการเกิดโรคหลักของไข้เลือดออก. ดังนั้นโดยทั่วไป NSI จึงใช้เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสําหรับการตรวจหาโรคนี้ตั้งแต่เนิ่นๆ

ในการศึกษานี้ การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์แซนวิช(เอลิซ่า)ร่วมกับไทโอนิโคตินาไมด์อะดีนีนไดนิวคลีโอไทด์ (thio-NAD/S-NAD)วิธีการปั่นจักรยาน (ต่อไปนี้จะเรียกว่า ELISA ที่ไวต่อการแพ้ง่าย) ใช้เพื่อตรวจจับ NSI ตามด้วยการเปรียบเทียบกับ NAAT เพื่อยืนยันความแม่นยําในการตรวจจับ

2. ข้อดีและข้อเสียของวิธีการตรวจจับแบบดั้งเดิมสําหรับไข้เลือดออก 

ปัจจุบัน tต่อไปนี้เป็นวิธีการตรวจจับหลักสี่วิธีเพื่อ ไข้เลือดออก


การแยกและระบุไวรัสมีความจําเพาะสูง แต่ใช้เวลานาน ใช้เวลาอย่างน้อย 5 วัน การทดสอบแอนติเจนอย่างรวดเร็วเป็นวิธีที่เร็วและคุ้มค่าที่สุดในบรรดาวิธีอื่นๆ แต่ความไวและความจําเพาะค่อนข้างต่ํา การทดสอบทางเซรุ่มวิทยาโดยใช้ IgM และ IgG ถูกจํากัดด้วยจํานวนวันของการติดเชื้อ เนื่องจากพื้นที่การทดสอบจะต้องล่าช้าจนกว่าระดับของแอนติบอดีจะสูงขึ้นถึงระดับที่ตรวจพบได้

ในคลินิกมักใช้ NAAT เพื่อกําหนดไข้เลือดออกโดยสิ่งสกปรกที่มีความไวและความจําเพาะสูง อย่างไรก็ตามวิธีนี้มีราคาแพงลําบากและมีแนวโน้มที่จะเกิดผลบวกที่ผิดพลาดซึ่งต้องดําเนินการโดยบุคลากรที่ผ่านการฝึกอบรมเพื่อเอาชนะข้อเสียของวิธีการเหล่านี้วิธีการตรวจจับใหม่ELISA ที่ไวต่อแสงเป็นพิเศษคือ นําไปใช้ในการศึกษานี้

3. เวิร์กโฟลว์ของ ELISA ที่มีความไวสูงเป็นพิเศษด้วยการปั่นจักรยาน thio-NAD

แอนติบอดีคู่หนึ่งคือใช้สําหรับจับโปรตีน NS1 ในแซนวิช ELISA และอัลคาไลน์ฟอสฟาเทสคือติดฉลากบนแอนติบอดีทุติยภูมิ นอกเหนือจากแอนติบอดีแล้ว อนุพันธ์ของแอนโดรสเตอโรน 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD และ NADHคือใช้ในการสร้างระบบการหมุนเวียนของเอนไซม์ thio-NAD ในระหว่างปฏิกิริยาการหมุนเวียนของ thio-NAD thio-NADH จะสะสมอย่างต่อเนื่องในรูปแบบตัวเลขสามเหลี่ยม และสามารถวัดได้โดยตรงที่การดูดกลืนแสง 405 นาโนเมตร.

4. การเปรียบเทียบ ELISA และ NAAT ที่มีความไวสูงในการตรวจหาโปรตีนไข้เลือดออก NS1

ใน NAAT ตัวอย่าง 60 ตัวอย่างเป็นบวกต่อไข้เลือดออก และ 25 ตัวอย่างเป็นลบของไข้เลือดออก ค่าเกณฑ์การปั่นจักรยาน (CT) ของ NAAT ของตัวอย่างที่เป็นบวกของไข้เลือดออกเหล่านั้นอยู่ระหว่าง 12.42 ถึง 31.41ใน ELISA ที่มีความไวสูงเป็นพิเศษ 59 ตัวอย่างมีผลบวกต่อผลลัพธ์ NAAT ในขณะที่ 25 ตัวอย่างเป็นลบอย่างสมบูรณ์ต่อผลลัพธ์ NAAT

เมื่อเทียบกับ NAAT ความไวและความจําเพาะของ ELISA ที่ไวต่อการแพ้ง่ายเป็นพิเศษคือ 98.3% และ 100% ตามลําดับ (ตารางที่ 2) จากตัวอย่างผู้ป่วยไข้เลือดออกที่ได้รับการยืนยันจาก NAAT 60 ตัวอย่าง มีเพียง 1 ตัวอย่างเท่านั้นที่เป็นลบใน ELISA ที่มีความไวสูง ข้อมูลของ NAAT แสดงให้เห็นว่าตัวอย่างเป็นกรณีการติดเชื้อ DENV ประเภท 4 ที่มีค่า CT 21.59 ผลลัพธ์ของ ELISA ที่มีความไวสูงนั้นเกือบจะสอดคล้องกับผลลัพธ์ของ NAAT โดยมีค่า kappa เท่ากับ 0.972 (95% CI: 0.917-1.0).

5. สรุป

วิธี ELISA ที่มีความไวสูงนั้นง่ายต่อการดําเนินการและไม่จําเป็นต้องมีผู้เข้ารับการฝึกอบรมมืออาชีพในการใช้งาน การตรวจจับสามารถเริ่มได้ทันทีหลังจากได้รับตัวอย่างขนาดเล็ก เหมาะอย่างยิ่งสําหรับการตรวจหาโรคไข้เลือดออกตั้งแต่เนิ่นๆ ในประเทศที่มีรายได้ต่ํา

หนังสืออ้างอิง

เฉิน, Po-Kai และคณะ "วิธีการตรวจจับขั้นสูงสําหรับโปรตีนไข้เลือดออก NS1 โดยใช้ ELISA ที่ไวต่อการปั่นจักรยาน Thio-NAD" ไวรัส เล่ม 15,9 พ.ศ. 2437 8 ก.ย. 2023, doi:10.3390/v15091894

ข้อดีของผลิตภัณฑ์และคุณสมบัติของบอนแทค ธียโอ-นาด/เอส-นาด

บอนแทค เป็น one ขององค์กรไม่กี่แห่งในจีนที่สามารถผลิต Thio-NAD ได้กับ"บอนไซม์"วิธีการทั้งเอนไซม์(เป็นมิตรกับสิ่งแวดล้อม;ไม่มีสารตกค้างของตัวทําละลายที่เป็นอันตราย) และ เทคโนโลยีการทําให้บริสุทธิ์เจ็ดขั้นตอน "Bonpure" ที่เป็นเอกลักษณ์ BONTAC รวมการวิจัยและพัฒนา การผลิต และการขายด้วย โรงงานของตนเองและการรับรองระดับสากลจํานวนหนึ่งเพื่อให้มั่นใจว่าผลิตภัณฑ์มีคุณภาพสูงและมีเสถียรภาพ.

ปฏิเสธ

บอนแทคจะไม่รับผิดชอบต่อการเรียกร้องใด ๆ ที่เกิดขึ้นโดยตรงหรือโดยอ้อมจากการที่คุณพึ่งพาข้อมูลและเนื้อหาบนเว็บไซต์นี้