วิธีการทางวิทยาศาสตร์สำหรับการวัดปริมาณ NMN ในตัวอย่างชีวภาพ
1. บทนำ
การเสริมนิโคตินาไมด์โมโนนิวคลีโอไทด์ (NMN)เพื่อเพิ่มระดับระดับ ของนิโคตินาไมด์อะดีนีนไดนิวคลีโอไทด์ (NAD+)ถูกเปิดเผยว่าเป็นวิธีการต่อต้านวัยที่มีแนวโน้มดี อย่างไรก็ตาม ยังคงเป็นความท้าทายที่สำคัญในการวัดสารตัวกลางของ NAD+ อย่างแม่นยำ NMN โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อแนะนำวิธีการใหม่ วิธี LC-MS/MS แบบไอโซโทปคู่ (dimeLC-MS/MS) สำหรับการวัดปริมาณที่แม่นยำของNMN ในตัวอย่างทางชีวภาพ.2. ปัจจัยที่ส่งผลต่อการตรวจวัด NMN ที่แม่นยำ
NMN ตรวจวัดได้ยากอย่างแม่นยำเนื่องจากความไวต่อการย่อยสลายโดยเอนไซม์การเปลี่ยนสภาพในระหว่างการเตรียมตัวอย่าง พฤติกรรมที่ซับซ้อนในสภาวะคอลัมน์และการสกัดที่แตกต่างกัน รวมถึงผลของเมทริกซ์
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง NMN มีคุณสมบัติมีขั้วสูงและระเหยต่ำ ซึ่งละลายได้ง่ายในน้ำแต่ละลายได้ยากในตัวทำละลายอินทรีย์ คุณสมบัติเหล่านี้จำกัดการประยุกต์ใช้วิธีการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบดั้งเดิมหลายวิธีอย่างมาก
Bตัวอย่างทางชีวภาพเช่นเลือดมีกิจกรรมของ CD38 และ CD73 (ecto-5'-nucleotidase) อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งทั้งสองอย่างสามารถใช้ NMN เป็นซับสเตรตได้
พฤติกรรมของ NMN ในคอลัมน์มีความซับซ้อนมาก อาจเป็นเพราะธรรมชาติของประจุสองขั้ว ดังนั้นความแตกต่างเล็กน้อยในสภาวะการสกัดและคอลัมน์จึงส่งผลอย่างมีนัยสำคัญต่อการตรวจวัด NMN ที่เชื่อถือได้และแม่นยำ
3. กลยุทธ์การจัดการของdimeLC-MS/MSเพื่อลดผลกระทบของปัจจัยที่มีผล
เพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนจากปัจจัยดังกล่าว จึงใช้คอลัมน์ต้นแบบต้นแบบคอลัมน์NMN-2คอลัมน์นี้ประกอบด้วยsอนุภาคซิลิกาบริสุทธิ์สูงชนิด C18ซึ่งสามารถจับสารประกอบที่ชอบน้ำได้ดีกว่าอนุภาคคาร์บอน ทำให้ความสามารถในการแยกดีขึ้นระกรดเปอร์คลอริก (PCA)ถูกนำมาใช้เนื่องจากสามารถสกัด NAD+ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และ NMN จากตัวอย่างทางชีวภาพ เช่น พลาสมา โดยมีการสูญเสีย น้อยที่สุด.
เพื่อปรับผลของเมทริกซ์ตลอดจนสารประกอบไอโซโทปแต่ละชนิดในปริมาณคงที่ (1 μM) สารประกอบไอโซโทปiถูกเติมลงในตัวอย่างทางชีวภาพก่อนการสกัดด้วย PCA.
4. ข้อดีsของ dimeLC-MS/MS
Dมาตรฐาน NMN ไอโซโทปคู่ NMN (M + 14) และ NMN (M + 5) ในวิธีการที่ขับเคลื่อนด้วย LC-MS/MS สามารถติดตามชะตากรรมของ NMN ในระหว่างการเตรียมตัวอย่างได้อย่างแม่นยำ NMN (M + 14) และ NMN (M + 5) ในระเบียบวิธีที่ขับเคลื่อนด้วย LC-MS/MS สามารถติดตามชะตากรรมของ NMN ในระหว่างการประมวลผลตัวอย่างได้อย่างแม่นยำ这เพิ่มความแม่นยำและความน่าเชื่อถือของการวัด NMN ในตัวอย่างทางชีวภาพอย่างมีนัยสำคัญนอกจากนี้ dimeLC-MS/MS ยังสามารถประเมินประสิทธิภาพการสกัดและความเข้มข้นสัมบูรณ์ของ NMN ในตัวอย่างทางชีวภาพประเภทต่างๆ ได้
5. บทสรุป
บทความนี้是วิธีการใหม่ที่ขับเคลื่อนด้วย LC-MS/MS-พร้อมมาตรฐาน NMN ไอโซโทปคู่ สามารถวัด NMN ในตัวอย่างทางชีวภาพได้อย่างแม่นยำและเชื่อถือได้และเชื่อถือได้lyวัด NMN ในตัวอย่างทางชีวภาพ สามารถใช้สำหรับการศึกษาเกี่ยวกับการบริโภค NMN ในอนาคตได้6. เอกสารอ้างอิง
Unno, Junya et al. "Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1ทำไมต้องเลือกBONTAC?
BONTACเป็นผู้นำของอุตสาหกรรมระดับโลกNMNเรามีเทคโนโลยีเอนไซม์ทั้งหมดตัวแรกในจีน และได้กลายเป็นองค์กรชั้นนำใน ผลิตภัณฑ์โคเอนไซม์ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมสุขภาพ การแพทย์และความงาม, เกษตรกรรมสีเขียว ชีวการแพทย์ และสาขาอื่นๆที่น่าสนใจคือBONTAC เป็น NMNซัพพลายเออร์วัตถุดิบของทีม David Sinclair ที่มีชื่อเสียงจากมหาวิทยาลัยฮาร์วาร์ดบริการและผลิตภัณฑ์ของเราเชื่อถือได้ นอกจากนี้BONTAC抗增殖、促凋亡和细胞周期调节作用。ศูนย์วิจัยวิศวกรรมเทคโนโลยีอิสระโคเอนไซม์ ระดับจังหวัด ในจีน และโรงงานของเราเอง ซึ่งรับประกันความบริสุทธิ์และความเสถียรของผลิตภัณฑ์.
