วิธีการทางวิทยาศาสตร์สําหรับการวัดปริมาณ NMN ในตัวอย่างชีวภาพ
1. บทนํา
การเสริมนิโคตินาไมด์โมโนนิวคลีโอไทด์ (NMN)เพื่อปรับเปลี่ยนระดับ ของนิโคตินาไมด์อะดีนีนไดนิวคลีโอไทด์ (NAD+)ได้รับการเปิดเผยว่าเป็นการแทรกแซงต่อต้านความชราที่มีแนวโน้มดี อย่างไรก็ตาม มันยังคงเป็น เป็นความท้าทายอย่างจริงจังในการทําให้ถูกต้องวัดปริมาณสารกึ่งกลาง NAD+ NMN โดยเฉพาะ การศึกษานี้มีศักยภาพในการนําเสนอวิธีการใหม่ คือ LC-MS/MS แบบใช้ไอโซโทปคู่ (dimeLC-MS/MS) เพื่อการวัดปริมาณอย่างแม่นยําNMN ในตัวอย่างชีวภาพ.2. ปัจจัยที่มีผลต่อการตรวจจับ NMN อย่างแม่นยํา
NMN ตรวจจับได้ยากเนื่องจากมีความเปราะบางต่อเอนไซม์การเสื่อมสภาพ การเปลี่ยนแปลงในกระบวนการตัวอย่าง พฤติกรรมซับซ้อนในสภาวะคอลัมน์และการสกัดที่แตกต่างกัน รวมถึงผลกระทบของเมทริกซ์
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง NMN มีคุณสมบัติเป็นขั้วสูงและมีความระเหยต่ํา ซึ่งละลายในน้ําได้ง่ายแต่ละลายได้ยากในตัวทําละลายอินทรีย์ คุณสมบัติเหล่านี้จํากัดการประยุกต์ใช้วิธีการวิเคราะห์เชิงปริมาณแบบดั้งเดิมหลายวิธีอย่างมาก
Bตัวอย่างทางชีววิทยาเช่น เลือดมีบทบาทสําคัญของ CD38 และ CD73 (ecto-5’-nucleotidase) ซึ่งทั้งสองชนิดสามารถใช้ NMN เป็นสารตั้งต้นได้
พฤติกรรมของ NMN ในคอลัมน์นั้นซับซ้อนมาก อาจเป็นเพราะลักษณะประจุแบบสองส่วน ทําให้ความแตกต่างเล็กน้อยในสภาพการสกัดและคอลัมน์ส่งผลต่อการตรวจจับ NMN อย่างแม่นยําและน่าเชื่อถือ
3. กลยุทธ์การรับมือกับไดม์ LC-MS/MS เพื่อลดผลกระทบของปัจจัยผลกระทบ
เพื่อหลีกเลี่ยงการรบกวนของปัจจัยที่กล่าวมาข้างต้น a pโรโตไทป์เสาNMN-2 ถูกนําไปใช้ คอลัมน์นี้บรรจุs อนุภาคซิลิกาบริสุทธิ์สูงที่มีฐานเป็น C18 ซึ่งสามารถจับสารที่ชอบน้ําได้มากกว่าคาร์บอน ทําให้แยกตัวได้ดีขึ้นPกรดเออร์คลอริก (PCA) ถูกจ้างงานเพราะสามารถ สกัด NAD+ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และ NMN จากตัวอย่างชีวภาพ เช่น พลาสมา โดยมีค่า การสูญเสีย.
เพื่อปรับให้เหมาะกับผลกระทบของเมทริกซ์a ปริมาณคงที่ (1 ไมโครเมตร) ของแต่ละชนิด สารประกอบไอโซโทปiถูกเพิ่มเข้าไปใน sชีวภาพ ตัวอย่างก่อนการสกัด PCA.
4. ข้อดีs ของ dimeLC-MS/MS
Dมาตรฐานไอโซโทป NMN แบบ ouble NMN (M + 14) และ NMN (M + 5) ในวิธีการขับเคลื่อนด้วย LC-MS/MS สามารถติดตามชะตากรรมของ NMN ได้อย่างแม่นยําในระหว่างการประมวลผลตัวอย่างซึ่งเพิ่มความแม่นยําและความน่าเชื่อถือของการวัด NMN ในตัวอย่างชีวภาพอย่างมีนัยสําคัญ. นอกจากนี้ dimeLC-MS/MS ยังสามารถประเมินประสิทธิภาพการสกัดและความเข้มข้นสัมบูรณ์ของ NMN ในตัวอย่างชีวภาพประเภทต่าง ๆ ได้
5. บทสรุป
ธเป็น LC-MS/MS ใหม่-วิธีการขับเคลื่อนด้วยมาตรฐาน NMN ไอโซโทปคู่ กระป๋อง อัคคูราเทลีย์ และเรลิอับลี วัด NMN ในตัวอย่างชีวภาพ สามารถใช้สําหรับการศึกษาการบริโภค NMN ในอนาคต6. เอกสารอ้างอิง
Unno, Junya และคณะ "การวัดปริมาณแบบสัมบูรณ์ของนิโคตินาไมด์โมโนนิวคลีโอไทด์ในตัวอย่างชีวภาพโดยการวิเคราะห์มวลแมสสเปกโตรเมตรีแบบแทนเด็มด้วยไอโซโทปสองชั้น (dimeLC-MS/MS)." npj aging เล่ม 10,1 2. 2 ม.ค. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1ทําไมต้องเลือกบอนแทค?
บอนแทคเป็นผู้นําระดับโลกNMNอุตสาหกรรม เรามีเทคโนโลยีเร่งปฏิกิริยาเอนไซม์ทั้งตัวเป็นครั้งแรกในประเทศจีน และได้กลายเป็นองค์กรชั้นนําใน ผลิตภัณฑ์โคเอนไซม์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมสุขภาพ การแพทย์ และความงาม, เกษตรกรรมสีเขียว ชีวเวชศาสตร์ และสาขาอื่น ๆ ที่น่าสังเกตคือบอนแทคคือ NMNผู้จัดหาวัตถุดิบให้กับทีม David Sinclair ที่มีชื่อเสียงที่มหาวิทยาลัยฮาร์วาร์ด. บริการและผลิตภัณฑ์ของเราน่าเชื่อถือ นอกจากนี้บอนแทคมีอิสระโคเอนไซม์ ศูนย์วิจัยเทคโนโลยีวิศวกรรมระดับจังหวัด ในประเทศจีน และโรงงานที่เป็นเจ้าของเอง ซึ่งสามารถรับประกันความบริสุทธิ์และความมั่นคงของผลิตภัณฑ์ได้.
