ข้อดีอันยอดเยี่ยมของ ELISA ที่ไวต่อการกระตุ้น Thio-NAD ในการตรวจหาโปรตีน NS1 ของไข้เลือดออก
1. บทนํา
ไข้เลือดออกเป็นโรคติดเชื้อเฉียบพลันที่เกิดจากไวรัสไข้เลือดออก ผ่านการกัดของยุงสายพันธุ์ Aedes (Ae. aegypti หรือ Ae. albopictus) ที่ติดเชื้อ,มีอาการหลัก เช่น ไข้สูง เวียนศีรษะ ปวดศีรษะ ผื่น และรุนแรง อาการปวด (ปวดตา กล้ามเนื้อ ข้อต่อ หรือปวดกระดูก) เป็นต้น โรคนี้พบได้ทั่วไปในภูมิอากาศเขตร้อนและกึ่งร้อน มีผู้ติดเชื้อประมาณ 100 ถึง 400 ล้านคนต่อปี โดยมากกว่า 80% มักเป็นอาการเล็กน้อยและไม่มีอาการ อย่างไรก็ตาม ไข้เลือดออกรุนแรงสามารถเพิ่มความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตหากไม่ได้รับการรักษาอย่างถูกต้อง ดังนั้น การวินิจฉัยโรคนี้ตั้งแต่เนิ่น ๆ จึงมีความสําคัญต่อการรักษาอย่างทันท่วงทีที่น่าสังเกตคือ โปรตีนชนิดไม่โครงสร้างหมายเลข 1 (NS1) ซึ่งเป็นไกลโคโปรตีนที่อนุรักษ์ไว้สูง จะถูกหลั่งออกมาเป็นหลักระหว่างการติดเชื้อไข้เลือดออกไวรัส, ซึ่งถือว่าเป็นปัจจัยการเกิดโรคหลักอย่างเข้มข้นไข้เลือดออก. ดังนั้น NSI จึงมักถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสําหรับการตรวจพบโรคนี้ในระยะเริ่มต้น
ในการศึกษานี้ การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนต์แบบเอนไซม์แซนด์วิเศษ (เอลิซา) ร่วมกับไทโอ นิโคตินาไมด์ อะดีนีน ไดนิวคลีโอไทด์ (ไทโอ-แนด/เอส-นาด)วิธีการปั่นจักรยาน (ต่อไปนี้จะเรียกว่า ELISA ที่ไวต่อการสัมผัสมาก) ถูกใช้เพื่อตรวจจับ NSI ตามด้วยการเปรียบเทียบกับ NAAT เพื่อยืนยันความแม่นยําในการตรวจจับ
2. ข้อดีและข้อเสียของวิธีการตรวจจับแบบดั้งเดิมสําหรับไข้เลือดออก
ปัจจุบัน, tนี่คือ 4 วิธีตรวจจับหลักสําหรับ ไข้เลือดออก
การแยกไวรัส และการระบุชนิดมีความจําเพาะสูงแต่ใช้เวลานาน ใช้เวลาอย่างน้อย 5 วัน The แอนติเจนเร็ว การทดสอบเป็นวิธีที่เร็วที่สุดและคุ้มค่าที่สุดในบรรดาวิธีอื่น ๆ แต่ความไว และความจําเพาะค่อนข้างต่ํา การทดสอบทางเซโรโลจีโดยใช้ IgM และ IgG มีข้อจํากัด จํานวนวันที่ติดเชื้อ เช่นเดอะการทดสอบต้องเลื่อนออกไปจนกว่าจะได้ระดับแอนติบอดี เพิ่มขึ้นจนสามารถตรวจจับได้
ในคลินิก NAAT มักถูกนํามาใช้เพื่อกําหนดไข้เลือดออก โดยความไวและความจําเพาะสูง อย่างไรก็ตาม วิธีนี้มีค่าใช้จ่ายสูง ใช้แรงงาน และมีโอกาสเกิดความคิดบวกที่ผิดพลาด ซึ่งต้องดําเนินการโดยบุคลากรที่ผ่านการฝึกอบรมเพื่อแก้ไขข้อเสียของวิธีการเหล่านี้ จึงมีวิธีการตรวจจับแบบใหม่ELISA ที่ไวต่อการสัมผัสมาก ถูกนําไปใช้ในการศึกษานี้
3. กระบวนการทํางานของ ELISA ที่ไวต่อการตรวจจับสูงกับการหมุน thio-NAD
แอนติบอดีคู่หนึ่งเป็น ใช้สําหรับจับโปรตีน NS1 ในแซนด์วิช ELISA และอัลคาไลน์ฟอสฟาเทสเป็น ติดฉลากบนแอนติบอดีทุติยภูมิ นอกจากแอนติบอดีแล้ว ยังมีอนุพันธ์แอนโดรสเตอโรน, 3α-ไฮดรอกซีสเตียรอยด์ดีไฮโดรจีเนส, ไทโอ-NAD และ NADHเป็น ใช้ในการสร้างระบบหมุนเวียนเอนไซม์ไทโอ-นาด ในระหว่างปฏิกิริยาวงจรไทโอ-นาด ไทโอ-นาเอดห์จะสะสมอย่างต่อเนื่องในรูปแบบตัวเลขสามเหลี่ยมและสามารถวัดได้โดยตรงที่การดูดกลืน 405 นาโนเมตร.
4. การเปรียบเทียบ ELISA และ NAAT ที่ไวมากในการตรวจหาโปรตีน NS1 ของไข้เลือดออก
ใน NAAT มีตัวอย่าง 60 ตัวอย่างที่เป็นบวกต่อไข้เลือดออก และ 25 ตัวอย่างเป็นลบ ค่าขีดจํากัดการปั่นจักรยาน (CT) ของ NAAT ของตัวอย่างที่เป็นบวกจากไข้เลือดออกอยู่ระหว่าง 12.42 ถึง 31.41ใน ELISA ที่ไวต่อการตรวจ พบว่ามีตัวอย่าง 59 ตัวอย่างที่เป็นบวกต่อผลลัพธ์ NAAT ในขณะที่ 25 ตัวอย่างเป็นลบต่อผลลัพธ์ของ NAAT อย่างสมบูรณ์เมื่อเทียบกับ NAAT ความไวและความจําเพาะของ ELISA ที่ไวมากอยู่ที่ 98.3% และ 100% ตามลําดับ (ตารางที่ 2) จากตัวอย่างผู้ป่วยที่ยืนยันว่าเป็นไข้เลือดออก 60 ตัวอย่าง มีเพียง 1 ตัวอย่างที่เป็นลบในกลุ่ม ELISA ที่ไวต่อการตรวจ ข้อมูลจาก NAAT แสดงให้เห็นว่าตัวอย่างเป็นกรณีติดเชื้อ DENV ชนิดที่ 4 โดยมีค่า CT 21.59 ผลลัพธ์ของ ELISA ที่ไวมากนั้นเกือบจะสอดคล้องกับผลของ NAAT โดยมีค่า kappa ที่ 0.972 (ช่วงความเชื่อมั่น 95%: 0.917-1.0).
5. บทสรุป
Uวิธี ELISA ที่ไวต่อความไวต่อการปฏิบัติงานง่ายและไม่ต้องการผู้ฝึกงานมืออาชีพในการใช้งาน. Tสามารถเริ่มตรวจจับได้ทันทีหลังจากได้รับตัวอย่างขนาดเล็ก เหมาะอย่างยิ่งสําหรับการตรวจพบตั้งแต่เนิ่นๆไข้เลือดออกโรคใน ประเทศรายได้น้อย.เอกสารอ้างอิง
Chen, Po-Kai และคณะ "วิธีการตรวจจับขั้นสูงสําหรับโปรตีน NS1 ของไข้เลือดออกโดยใช้ ELISA ที่ไวมากกับการหมุนเวียน Thio-NAD" ไวรัส เล่ม 15,9 ปี 1894 8 ก.ย. 2023, doi:10.3390/v15091894ข้อดีและคุณสมบัติของผลิตภัณฑ์บอนแทค ไทโอ-นาด/เอส-นาด
บอนแทค คือ oหนึ่งในไม่กี่กิจการในจีน ที่สามารถผลิต Thio-NAD ได้, กับ"บอนไซม์" วิธีเอนไซม์ทั้งตัว (เป็นมิตรกับสิ่งแวดล้อม; ไม่มีสารตกค้างของตัวทําละลายที่เป็นอันตราย) และ เทคโนโลยีการกรอง "Bonpure" เจ็ดขั้นตอนที่ไม่เหมือนใคร BONTAC ผสานงานวิจัยและพัฒนา การผลิต และการขาย กับ โรงงานที่เป็นเจ้าของเองและการรับรองระดับนานาชาติหลายรายการเพื่อรับประกันคุณภาพสูงและการจัดหาสินค้าที่มั่นคง.
